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3分鐘帶你學(xué)會HE染色試劑盒的操作使用

更新時間:2022-10-14   點(diǎn)擊次數(shù):1396次
  HE染色試劑盒的具體操作步驟如下:
 
  1、取材,固定:固定液——甲醛(福爾馬林)
 
  從人或動物新鮮尸體上取下組織塊投入預(yù)先配好的固定液中使組織、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變性凝固,以防止細(xì)胞死后的自溶或細(xì)菌的分解,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。
 
  2、修剪,脫水,透明:脫水劑——酒精
 
  透明劑——二甲苯
 
  不同組織固定時間不同,固定成功后需要修剪25px*25px*5px,放入包埋盒中,流水沖洗30分鐘。至于不同濃度的酒精脫水,一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出組織塊的中酒精,才能浸蠟包埋。
 
  3、浸蠟,包埋:石蠟
 
  將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中,放入溶蠟箱保溫。待石蠟*浸入組織塊后進(jìn)行包埋,冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬,才能在切片機(jī)上切成很薄的切片。
 
  4、切片、展片、烤片:
 
  將包埋好的蠟塊固定于切片機(jī)上,切成薄片,一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折,要放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,放45℃恒溫箱中烘干。
 
  5、染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,最后入蒸餾水,就可染色。
 
  蘇木精是一種堿性染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,被堿性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿性。伊紅(Eosin,E)是一種酸性染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,被酸性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸性。

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